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如何减少人ELISA试剂盒操作误差?

发布时间: 2021-12-13  点击次数: 208次
  在人ELISA试剂盒的实验操作中,误差可分为系统误差、偶然误差和疏忽误差,一个小小的错误想法都会影响实验。很多人经常因为一个小细节和一个错误而未能使实验成功。那么如何降低实验出错的概率呢?除了小心,还有一些重要的点需要注意。
 

人ELISA试剂盒

 

  1、检验技术人员应具备实验室操作的基本素质和实践经验。能够熟练操作实验仪器和仪器,具有总结分析问题的能力,及时妥善解决实验中的突发情况。
  2、使用校准过的微量移液器来消除自然误差。移液器是否准确对于定量检测尤为重要。
  3、仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范操作。不同批次的试剂不得混用。值得改进的地方,只有经过反复测试和确认才能改进。
  4、彻底清洗。如果板没有彻底清洗,酶标的背景颜色将显示假阳性。洗涤液应该是新鲜的,可以直接使用。旧洗涤液的背景会增加,也可能出现假阳性。
  5、严格控制反应时间。如果反应时间过长,酶会失活;反应时间过短,酶联物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,产物结构松散不稳定,容易洗掉,容易造成假阴性。
  6、注意人ELISA试剂盒的存放期限。超过保存期限的试剂不能使用。
  7、评价试剂的实用性和稳定性对准确性很重要。试剂使用前,应对样品进行阴性、阳性对照及重复比对试验,确定试剂符合要求后方可使用。
  8、严格控制显色时间。如果显色时间太短,加入终止液后底物偶联物的量太少,反应终止,容易出现假阴性。如果在显色所需的时间后显色,则判断为假阳性,这可能与试剂本身有关。加入显色剂后应立即显色,可能是底色显色的结果。
  9、准确快速地添加样品。如果人ELISA试剂盒加样不准确,则无法确定酶积量,直接影响显色效果。显色深度和数值的确定与显色剂和终止液的用量有关,因此取样时要小心。对于要求在一定时间内完成加样的实验,加样缓慢,会出现误差,试剂会长时间暴露,尤其是室温过高时,存放时间会变长。缩短甚至无效。

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