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金霉素检测试剂盒操作流程和使用事项来了!

发布时间: 2022-03-15  点击次数: 260次
  金霉素检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被金霉素抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色,颜色的深浅和样品中的金霉素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
 

金霉素检测试剂盒
 

 

  金霉素检测试剂盒(定性)操作流程:
  1、试剂盒从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4°C。
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50uL。
  3、样本孔中加入待测样本50uL;空白孔不加。
  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100uL,用封板膜封住反应孔,37°C水浴锅或恒温箱温育60min。
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
  6、每孔加入底物A.B各50uL,37°C避光孵育15min。
  7、每孔加入终止液50uL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
  金霉素检测试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,结果乘以5才是样本实际浓度。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作,所有液体组分使用前充分摇匀。

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